CRISPR/Cas9基因编辑技术（包含Base editor）专刊研讨会（5.14-15 网络精讲班）

CRISPR/Cas9技术开样的建起

2.2、CRISPR/Cas9技术开样的广泛应用

2.3、CRISPR/Cas9技术开样的脱靶问题

三、Cas细胞的自由选择

1、Cas细胞的自由选择

1.1、Cas细胞的分类

1.2、三种广泛应用最广泛的Cas细胞

1.3、Cas9细胞的骨架特点简介

1.4、Cas9细胞与PAM序列

1.5、Cas9的肽链提高效率与NLS

1.6、如何自由选择Cas细胞？

2、Cas细胞天然资源检索

3、以上段落就其检验的注意大事项、检验善于、检验结果问答

第一天中的午13:30-17:00

四、CRISPR（gRNA）的内部设计与制取

1、内部设计gRNA前需要明确的大事（撰稿人出样点的自由选择、甲基化骨架分析及检索原理）

2、RNA的内部设计（因特网互动内部设计远海）

3、gRNA表达出来载体的框架

3.1、gRNA的活体表达出来（RNP）

3.2、gRNA细胞表达出来载体框架

3.3、少用gRNA/Cas细胞表达出来载体

4、以上段落就其检验的注意大事项、检验善于、检验结果问答

五、gRNA活性探测

1、 Indel甲基化探测的基本出样点

1.1、错配内切酶通则（EMC）

1.2、TIDE/ICE计量

1.3、TA他的团队通则

1.4、酶切片断长度多态性通则（RFLP）

1.5、其他原理

2、基于胚胎的活性验证原理

3、以上段落就其检验的注意大事项、检验善于、检验protocol、检验结果问答

六、甲基化撰稿人物件Cas12a(Cpf1)

1、Cpf1的样现

2、Cpf1与Cas9的区别

3、Cpf1的广泛应用案例

4、Cpf1可同时介导多个甲基化的撰稿人

第二天上午8:30-11:30

七、为了让CRISPR/Cas9技术开样建立甲基化组撰稿人细胞系

1、前提甲基化的甲基化组构成分析

1.1 前提甲基化在目的细胞中的的表达出来情况

1.2 如何明确甲基化的重要的功能域

1.3 可变剪接及多mRNA本

2、甲基化组撰稿人出样点内部设计

2.1甲基化敲除

2.2甲基化敲入

2.3定点甲基化

2.4大片断删除

3、sgRNA的内部设计与活性验证

3.1 如何自由选择一段距离合适的gRNA？

4、主要用途甲基化敲入的供体DNA的内部设计

4.1 Donor DNA的形式

4.2 主要用途ssODN作为Donor

4.3 内部设计ssODN的要点

4.4 弹出残基与DSB残基一致的情况

4.5 弹出残基与DSB残基不一致的情况

5、真核生物（和/或供体）导入细胞系的原理（小分子转染，电转，病毒感染转导）

6、阳性他的团队检验

6.1 低剂量检验（Protocol）

6.2 抽单细胞他的团队（Protocol）

6.3 甲基化型鉴别

6.4根据卡罗斯可靠性估算需要检验的他的团队生产量

6.5 有限稀释通则稀释细胞的流程（Protocol）

6.6 甲基化型鉴别

7、甲基化组撰稿人细胞系的建起

8、提高甲基化敲入（同源重组）可靠性的出样点

9、以上段落就其检验的注意大事项、检验善于、检验protocol、检验结果问答

八、CRISPR/Cas系统会介导的甲基化撰稿人案例讲解

1、CRISPR常规工作流程

2、Knock-out案例1

3、Knock-out案例2

4、Knock-in案例

第二天中的午13:30-17:00

九、为了让CRISPR技术开样建立甲基化组撰稿人生物

1、CRISPR/Cas原理与传统原理的比较

2、甲基化撰稿人生物制取流程

3、通过显微注射通则制取甲基化撰稿人豚鼠

3.1、豚鼠的超排和显微注射

3.2、胚胎移植和甲基化型鉴别

3.3、显微注射通则授予的甲基化撰稿人生物的鉴别

4、通过生殖细胞他的团队通则制取甲基化撰稿人生物

4.1、供生殖细胞分立、培养

4.2、供生殖细胞的甲基化撰稿人

4.3、生殖细胞核移植可用

4.4、胚胎移植

4.5、甲基化撰稿人个体的鉴别和扩繁

十、CRISPRmRNA诱导/mRNA激活以及CRISPRscreen

1、dCas9的特征简介

2、运主要用途CRISPR技术开样完成mRNA调控的原理

3、CRISPRmRNA诱导/mRNA激活技术开样及提高效率

4、CRISPRoff

5、CRISPR screen及CRISPRa/iscreen（高通量检验）

十一、单氨基酸撰稿人与单氨基酸撰稿人器（CBE、ABE、PE）

1、 单氨基酸撰稿人器的原理

2、 单氨基酸撰稿人器的提高效率

3、 先导撰稿人技术开样原理及其广泛应用

十二、甲基化撰稿人技术开样的脱靶问题

1、 脱靶造成了的原因

2、 甲基化撰稿人物件的脱靶风险

3、 脱靶探测原理

4、 如何减少脱靶？

十三、Cas12和Cas13细胞及其广泛应用

1、 Cas12和Cas13与Cas9的差异

2、 Cas13特点及其在蛋白质探测中的的广泛应用

3、 SHERLOCK及DETECTR系统会原理

十四、甲基化撰稿人技术开样就其天然资源

讲解CRISPR/Cas系统会以及甲基化撰稿人就其的真核生物、gRNA、小学馆、细胞、Protocol以及技术开样blog等天然资源。

会务文档

一段时间地点：

2022/5/14-15 主要用途腾讯会议服务端完成因特网讲课（非录播)

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3200元/人

报名者付主要用途费顺利后，课前样专业训练需要应加有进的软件，并且指导安装

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